正常造就中（或稳转293细胞系的补料批造就），造就D3/D5/D7别离增长造就体积5%比例HA01补料，也就是隔天加。若是利用于瞬转蛋白的表白，必要转染后16-24h后增长补料。补料成分重要就是一些氨基酸、葡萄糖和微量元素。
031c重要是合用于293稳转细胞株的系统，增长规划是5%，持续补料，不容易出现渗入压过高的情况。041c重要是合用于瞬转的系统，用于扩增病毒或者蛋白，转染后24h补料一次，补料比例为工作体积的5%，在后续造就过程中必要维持残糖浓度在20 mM左右。
稳转造就由于一向加补料，必要沉点关注渗入压的情况，以及里面的糖分必要监测，通常节造在6g/L。谷氨酰胺必要每周测一次。
血糖仪的误差比力大，研发人员之前用尺度液测过一次，比现实的值低三分之一？突芄灰幌蛴醚且墙屑嗖，凭据初始的糖量，后续补糖节造在初始的量的领域亦可（好比一路头血糖仪测的是4g/L，那么后续就节造在用血糖仪测的都是4g/L即可）。
凭据分歧蛋白的具体情况来看，可能隔天收，可能最终收。要看蛋白是不是容易降解的蛋白，若是是容易降解的蛋白就必要实时收取。若是像IgG这种不容易降解的蛋白，通常就是最后收。要把稳蛋白产量高上去之后天生和降解的动态平衡。
293细胞做瞬转蛋白表白，5-7天后通常能够得到100mg-1000mg/L。CHO细胞持久用于稳转蛋白表白，有的能够做到10g/L，开发的工艺和有关的造就基开发都比力成熟，所以表白量都要比293高。
我们这里通常是用HPLC过Protein A 柱子来检测，或者用R8蛋白质分析系统通过检测结合速度来确定蛋白产量？突羰怯肂CA来测也能够，必要把稳去除殒命的宿主蛋白。样品的处置步骤为10000rpm离心5min后，用0.22μm过滤后，若是是BCA步骤必要提前纯化去除杂蛋白再检测。这三种步骤由于我们这里没有尺度品，不好说哪个更准。
不会，293细胞属于永生细胞系，能够一向传代，通常在20-30代以内没有太大问题。
明确是不含有细胞周期阻断成分的，好比丁酸钠，VPA（丙戊酸钠）之类的
不成以造就贴壁的293细胞，只能进行无血清悬浮驯化成悬浮293细胞，贴壁293 的病毒出产能够推动病毒出产无血清造就基（换液造就基），降低下游纯化压力
